【家庭】家庭开展组培工作室


家庭开展组培工作室制备

家庭组培因受到条件的限制 , 不可能配置大量的配养基 ,  , 一般每次配置1升为宜 。 煮制后用ph试纸测定后 , 分装成35-40瓶 , 塞好棉塞 , 包好包头纸 。 (棉塞一定要用作棉衣的棉花卷制 , 不能使用脱脂棉 , 然后用纱布包紧 , 用棉线扎好 。 棉塞的松紧以手提棉塞瓶子不滑落为宜 。 )然后放入高压锅里高压灭菌 , 待高压锅喷嘴喷出蒸汽时 , 扣上压力阀 , 从压力阀喷气时起计时 , 连续维持15-20分钟后关火 , 压力消失后 , 打开锅盖 , 取出配养基 , 放入接种箱内待用 。 初次实验时 , 灭菌后的培养基应放置三五天后 , 观察无霉菌生长时才能使用 。 如有霉菌长出 , 这说明灭菌时间不够 ,  , 需要适当增加灭菌时间 。

接种

将灭菌后的配养基、无菌水、消毒药水及使用的器材放入接种箱内 , 因接种箱内的体积相对较小 , 所以所用的一切物品都要有序地摆放在相应的位置上 , 不能随意摆放 , 箱内湿度较大 , 点酒精灯一定要是用打火机 , 不要使用火柴 。 要特别注意准备好装污水、污物的容器 , 尽可能地大一些 , 因为操作时是不容许开箱取物的 。 把所有的物品放置好以后 , 将一装有10-20ml福尔马林的磁杯放入箱内(最好不要使用玻璃杯 , 因反应时温度较高 , 容易炸裂 。 ) , 倒入2-5g高锰酸钾(pp粉) , 使其蒸气充满箱内 , 达到灭菌的效果 。 这时要将接种箱的通气孔和操作孔封闭好 , 避免甲醛蒸气很快散尽 。 待箱内蒸气散尽后 , 才能开始接种工作 , 这段时间大约需要5-10个小时 。

接种时 , 揭去密封在接种箱通气孔和操作孔上的密封物 , 取出熏蒸用的磁杯 , 将接种用的材料送入接种箱内 , 开启紫外线灯 , 十五分钟后关闭紫外线灯 , 开启照明灯 , 即可开始工作 。 操作时一定要树立无菌观念 , 要把一切物品都看成是带菌的 , 要时时都注意防范 。 工作是由于箱内温度较高 , 湿度较大 , 手容易出汗 , 所以每接种一瓶后都要用酒精擦拭手指 , 也可以戴指套 。 另外 , 操作时要注意防火 , 由于空间较小 , 一不小心就容易烧伤手指或引起酒精起火 。 打开瓶塞时 , 要将瓶口置于酒精灯上方 , 用右手的无名指和小指夹住棉塞尾 , 轻轻将棉塞拔出 , 棉塞不能置于箱内物品上 , 应用手指夹住 , 接种后 , 将瓶口在酒精灯上烧灼一下 , 棉塞也烧灼一下 ,  , 然后在酒精灯火焰上方轻轻塞好 , 扎好包头纸 , 用铅笔标明品种、接种日期、编号等 , 然后重复下一瓶 。

其实 , 用接种箱接种与超净工作台相比较 , 工作时人要感觉舒适得多 。 污染率也是很低的 , 操作熟练后几乎没有什么污染发生 。 接种后愈伤组织分化、小苗分化、生长状态与在超净台上接种的没有什么两样 。

培养

在家庭的业余条件下培养培养的条件不可能得到专控 , 所以要充分的利用自然条件 , 接种后的培养瓶可以放在有较强散射光的地方 , 如靠窗的书柜、写字台上 , 但要避免日光直射 , 一般室温在22-28摄氏度时都能正常生长 , 不是特殊的品种不需要特殊的护理 。 如室温太低 , 可以用纸板、木条、塑料薄膜做一个简单的培养箱 , 里面装一两个15-25瓦的白织灯 , 既可以補助光照也可以提高培养的温度 。 夏天温度过高时 , 有条件的可以摆放在空调室内 ,  , 没有空调室的 , 降温虽然困难一些 , 但大多数试管苗是可以耐受的 , 不至于死去 。 小苗长出后 , 摆放在书柜或工作台上 , 感到自己培养出来的生机勃勃的小生灵 , 无疑是一种享受 。

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